ATCC細(xì)胞接收操作：

　　1．由于細(xì)胞運(yùn)輸途中存在較多不可控因素（如溫度變化，強(qiáng)烈振蕩，時(shí)間較長(zhǎng)，生長(zhǎng)條件不適宜），可能出現(xiàn)漏液，污染，細(xì)胞漂浮及死亡等狀況，因此請(qǐng)務(wù)必在收到細(xì)胞當(dāng)天提供原始細(xì)胞圖片。

　　圖片拍攝步驟：收到細(xì)胞快遞當(dāng)日必須先著重對(duì)培養(yǎng)基拍*組照片，觀察是否有漏液和培養(yǎng)基是否顏色變渾濁，是否變異常，并顯微鏡下拍細(xì)胞100X，200X各兩張，拍攝照片應(yīng)清晰；第二組照片，未開(kāi)瓶蓋、未做任何處理把細(xì)胞培養(yǎng)瓶靜置在培養(yǎng)箱2--4h后進(jìn)行拍攝；第三組照片，細(xì)胞*次傳代后，如果細(xì)胞有問(wèn)題，要每天都有照片記錄下來(lái)提供給甲方。

　　根據(jù)提供的圖片，本公司技術(shù)人員分析細(xì)胞確有問(wèn)題，承諾免費(fèi)提供一次；若未在規(guī)定時(shí)間限制內(nèi)提供相關(guān)圖片，默認(rèn)收到細(xì)胞時(shí)細(xì)胞正常。

　　2.由于運(yùn)輸過(guò)程中的問(wèn)題，細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的貼壁細(xì)胞有可能從瓶壁中脫落下來(lái)，顯微鏡下觀察會(huì)出現(xiàn)細(xì)胞懸浮的情況，這時(shí)請(qǐng)?jiān)谂恼蘸髮腋〉募?xì)胞即時(shí)離心，加15%血清的*培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天；同時(shí)原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細(xì)胞更換為15%血清的*培養(yǎng)基，培養(yǎng)3天，3天后若原瓶或者新瓶中的細(xì)胞都沒(méi)有出現(xiàn)增殖而是繼續(xù)脫落死亡，請(qǐng)?zhí)峁┘?xì)胞圖片跟進(jìn)解決。（這里是針對(duì)原來(lái)*培養(yǎng)基FBS濃度是10%的情況，如果原來(lái)FBS濃度是20%，可以增加到25%FBS濃度）

　　3.收到細(xì)胞時(shí)若無(wú)以上兩種異常情況，請(qǐng)?jiān)陲@微鏡下觀察細(xì)胞密度，若為貼壁細(xì)胞，未超過(guò)80%匯合度時(shí)，將培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液吸出，留5ml左右培養(yǎng)基（T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶）繼續(xù)培養(yǎng)；超過(guò)80%匯合度時(shí)，請(qǐng)按照細(xì)胞培養(yǎng)條件進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

　　4.收到細(xì)胞，原瓶中的培養(yǎng)液若顏色正常，可以收集繼續(xù)使用，在*次消化傳瓶時(shí)，建議留一瓶細(xì)胞繼續(xù)使用我們的培養(yǎng)液，其他瓶的細(xì)胞可使用客戶自己的培養(yǎng)液進(jìn)行培養(yǎng)，這樣可以減少由于細(xì)胞不適應(yīng)培養(yǎng)液導(dǎo)致的問(wèn)題，請(qǐng)按照細(xì)胞處理方法進(jìn)行操作。

　　ATCC細(xì)胞株配制注意事項(xiàng)

　　1.細(xì)胞株經(jīng)滅菌后，必須放在37C溫箱培養(yǎng)24h，無(wú)菌生長(zhǎng)者方可使用。

　　2.ATCC細(xì)胞株一般不需要調(diào)pH。對(duì)于要調(diào)節(jié)pH的細(xì)胞株，一般用pH試紙測(cè)定其pH。如果細(xì)胞株偏酸或偏堿時(shí)，可用lmol/LNaOH或lmol/LHCL溶液進(jìn)行調(diào)節(jié)。調(diào)節(jié)時(shí)應(yīng)逐滴加入NaOH或HCl溶液，防止局部過(guò)酸或過(guò)堿破壞細(xì)胞株成分。

　　3.細(xì)胞株在使用時(shí)也可以做成不含瓊脂的液體細(xì)胞株，用于菌類(lèi)的震蕩培養(yǎng)。

　　4.ATCC細(xì)胞株也可以加入氯霉素或土霉素，加入量為0.2g/L細(xì)胞株，主要是為了抑制細(xì)菌的生長(zhǎng)，減少干擾性。

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